🔄

PBL Fall 6: Cellcykeln

Celldelning, cancer och tumörsuppressorer

Cellbiologi

🎯 Läringsmål

🔄

Cellcykelns faser

G1, S, G2 och M-fasens organisation och reglering

🛑

Checkpoints

G1/S, G2/M och spindelcheckpoints för kvalitetskontroll

🎛️

Cykliner och CDK:er

Cellcykelreglering genom cyklin-CDK-komplex

☠️

Apoptos

Programmerad celldöd och dess roll i cancerprevention

🧬

Cancergenetik

Onkogener, tumörsuppressorer och genetisk instabilitet

💊

Cancerterapi

Riktade terapier mot cellcykelproteiner och signalvägar

💡 Studietips

Läs både PBL-materialet och tentamenssammanfattningarna för bästa förståelse. PBL-fallen ger djupare kontext medan sammanfattningarna fokuserar på tentamensrelevant material.

📚 Om detta PBL-fall

Detta fall introducerar cellcykeln och cancer genom en patients resa från genetisk predisposition till kolorektal cancer. Du kommer att utforska cellcykelreglering, tumörsuppressorer och förstå hur störningar i celldelningen leder till malignitet.

🎯 Varför detta är viktigt

Förståelse för cellcykeln är grundläggande för att förstå cancer. Många moderna cancerterapier riktar sig mot specifika cellcykelproteiner och signalvägar.

👤 Fallbeskrivning: Eriks kolorektala cancer

Initial presentation

Erik, 58 år, söker för:

  • 🔸 Förändrade avföringsvanor - 3 månaders duration
  • 🔸 Blod i avföringen - Ljusröd färg, blandat med feces
  • 🔸 Viktnedgång - 8 kg på 4 månader utan diet
  • 🔸 Trötthet - Progressiv utmattning
  • 🔸 Buksmärtor - Kramper i vänster fossa
  • 🔸 Anemi - Hb 85 g/L (normalt 130-170)

👨‍👩‍👧‍👦 Familjeanamnes

Lynch syndrom i familjen:
  • Far: Kolorektal cancer vid 52 år
  • Farfar: Kolorektal cancer vid 48 år
  • Faster: Endometriecancer vid 45 år
  • Kusin: Kolorektal cancer vid 38 år
Amsterdam II-kriterier uppfyllda:
  • ≥3 släktingar med Lynch-associerad cancer
  • ≥2 generationer påverkade
  • ≥1 fall före 50 års ålder

🔍 Utredningsfynd

Koloskopi:
  • Tumör: 4 cm i sigmoideum
  • Utseende: Ulcererad, friabel
  • Stenosgrad: 50% luminal förträngning
  • Multipla polyper: 5 adenomatösa polyper
Histopatologi:
  • Adenocarcinom: Måttligt differentierat
  • MSI-high: Mikrosatellitinstabilitet
  • MLH1-förlust: Immunhistokemi negativ
  • Infiltrationsdjup: T3 (genom muscularis propria)

🔄 Cellcykelns faser

Översikt av cellcykeln

Cellcykeln är en välorganiserad serie av händelser som leder till celldelning. Den regleras av ett komplext nätverk av proteiner som säkerställer korrekt progression.

🟢 G1-fas (Gap 1)

  • Duration: ~11 timmar (mest variabel)
  • Huvudfunktion: Celltillväxt och förberedelse för DNA-replikation
  • Viktiga händelser:
    • Ackumulering av cykliner (särskilt cyklin D)
    • Aktivering av CDK4/6-cyklin D-komplex
    • Fosforylering av Rb-protein
    • Passage genom restriktionspunkten
  • G0-fas: Vilande tillstånd för icke-delande celler

🧬 S-fas (Syntes)

  • Duration: ~8 timmar
  • Huvudfunktion: DNA-replikation
  • Viktiga händelser:
    • Semikonservativ DNA-replikation
    • Centrosomduplicering
    • Histonsyntes
    • Aktivering av S-CDK (CDK2-cyklin A)
  • Kvalitetskontroll: DNA-skadecheckpoints aktiveras vid replikationsfel

🔧 G2-fas (Gap 2)

  • Duration: ~4 timmar
  • Huvudfunktion: Förberedelse för mitos
  • Viktiga händelser:
    • Fortsatt celltillväxt
    • Proteinsyntes för mitotisk maskineri
    • Centrosommognad
    • Tubulinsyntes för spindelapparat
  • M-CDK bildning: CDK1-cyklin B ackumuleras

🎯 M-fas (Mitos)

  • Duration: ~1 timme
  • Huvudfunktion: Celldelning
  • Faser:
    • Profas: Kromosomkondensation, kärnmembranupplösning
    • Prometafas: Kinetokorbindning, spindelkontakt
    • Metafas: Kromosomuppställning i ekvatorialplanet
    • Anafas: Systerkromatidseparation
    • Telofas: Kärnreformation, kromosomavkondensation
    • Cytokines: Celldelning genom kontraktil ring

🛑 Cellcykelcheckpoints

G1/S-checkpoint (Restriktionspunkten)

Den viktigaste checkpointen som avgör om cellen ska gå in i cellcykeln eller förbli i G0.

✅ Kontrollerar för:

  • Adekvat cellstorlek
  • Tillräckliga näringsämnen
  • Tillväxtfaktorsignaler
  • DNA-integritet
  • Frånvaro av stress

🔑 Nyckelproteiner:

  • p53: "Genomets väktare"
  • p21: CDK-inhibitor
  • Rb: Retinoblastomprotein
  • E2F: Transkriptionsfaktor
  • Cyklin D/CDK4,6: Drivkraft

G2/M-checkpoint

Säkerställer att DNA är korrekt replikerat innan mitos.

✅ Kontrollerar för:

  • Komplett DNA-replikation
  • Ingen DNA-skada
  • Adekvat cellstorlek
  • Korrekt proteinsyntes

🔑 Nyckelproteiner:

  • ATM/ATR: DNA-skadedetektorer
  • Chk1/Chk2: Checkpoint-kinaser
  • p53: Aktiveras vid DNA-skada
  • 14-3-3σ: Sekvestrerar cyklin B1/CDK1

Spindelcheckpoint (SAC)

Förhindrar anafas tills alla kromosomer är korrekt bundna till spindelfibrer.

✅ Kontrollerar för:

  • Bi-orienterad kinetokorbindning
  • Korrekt spänning mellan systerkromatider
  • Alla kromosomer bundna
  • Spindelapparatintegritet

🔑 Nyckelproteiner:

  • Mad2: Inhiberar APC/C
  • BubR1: Spänningssensor
  • Aurora B: Korrigerar felaktiga bindningar
  • APC/C: Anafas-promoting complex

🎛️ Cykliner och CDK:er

Cyklin-CDK-komplex genom cellcykeln

CDK:er (Cyclin-Dependent Kinases) är serin/treonin-kinaser som kräver bindning av cykliner för aktivitet. Cyklinkoncentrationer oscillerar genom cellcykeln medan CDK-nivåer förblir konstanta.

G1-fas komplex

CDK4/6-Cyklin D:
  • Initierar cellcykelinträde
  • Fosforylerar Rb (delvis)
  • Regleras av mitogena signaler
  • Inhiberas av p16^INK4a
CDK2-Cyklin E:
  • Fullständig Rb-fosforylering
  • Passage genom restriktionspunkten
  • Initierar DNA-replikation
  • Inhiberas av p21 och p27

S-fas komplex

CDK2-Cyklin A:
  • Driver DNA-replikation
  • Förhindrar re-replikation
  • Fosforylerar DNA-polymerasprocessivitetsfaktorer
  • Inaktiverar APC/C^Cdh1

G2/M-fas komplex

CDK1-Cyklin A:
  • Förbereder för mitos
  • Aktiverar tidiga mitotiska händelser
  • Degraderas före metafas
CDK1-Cyklin B (M-CDK):
  • Master regulator av mitos
  • Inducerar kärnmembranupplösning
  • Aktiverar spindelapparatbildning
  • Fosforylerar histoner för kromosomkondensation

⚠️ CDK-inhibitorer (CKI:er)

INK4-familjen:
  • p16^INK4a - Inhiberar CDK4/6
  • p15^INK4b - Induceras av TGF-β
  • p18^INK4c - Utvecklingsreglering
  • p19^INK4d - Neuronspecifik
Cip/Kip-familjen:
  • p21^Cip1 - p53-inducerad
  • p27^Kip1 - Kontaktinhibition
  • p57^Kip2 - Utveckling och differentiering

☠️ Apoptos - Programmerad celldöd

Apoptosens roll i cancerprevention

Apoptos är kroppens säkerhetsventil mot cancer. När celler får DNA-skador eller onormal tillväxtsignalering aktiveras celldödsprogram.

🔴 Inre vägen (Mitokondriell)

Aktiveras av:
  • DNA-skada
  • Cellulär stress
  • Tillväxtfaktorbrist
  • Hyperoxi
Nyckelsteg:
  1. p53-aktivering → Bax/Bak-induktion
  2. Mitokondriell permeabilisering
  3. Cytokrom c-frisättning
  4. Apoptosombildning (Apaf-1)
  5. Kaspas-9 → Kaspas-3/7 aktivering

🔵 Yttre vägen (Receptormedierad)

Aktiveras av:
  • Fas-ligand (FasL)
  • TNF-α
  • TRAIL
  • Immunförsvarsignaler
Nyckelsteg:
  1. Dödsreceptoraktivering
  2. DISC-komplexbildning
  3. Kaspas-8 aktivering
  4. Direkt kaspas-3/7 aktivering
  5. Bid-klyvning → mitokondriell amplifiering

🛡️ Anti-apoptotiska faktorer i cancer

  • Bcl-2 överuttryck: Blockerar mitokondriell permeabilisering
  • p53-mutationer: Förhindrar DNA-skadeinducerad apoptos
  • NF-κB aktivering: Uppreglerar överlevnadsgener
  • IAP-proteiner: Direkt kaspashämning

🧬 Cancergenetik

Onkogener vs Tumörsuppressorer

🚀 Onkogener

"Gaspedalen" - Driver celldelning framåt

Aktiveringsmekanismer:
  • Punktmutationer (RAS)
  • Genamplifiering (MYC, HER2)
  • Kromosomtranslokationer (BCR-ABL)
  • Viral insertion
Exempel:
  • RAS: 30% av all cancer
  • MYC: Transkriptionsfaktor
  • BCL-2: Anti-apoptotisk
  • HER2: Tillväxtfaktorreceptor

🛑 Tumörsuppressorer

"Bromsen" - Hämmar okontrollerad tillväxt

Inaktiveringsmekanismer:
  • Punktmutationer
  • Deletioner
  • Promotormetylering
  • Loss of heterozygosity (LOH)
Exempel:
  • p53: Muterat i 50% av cancer
  • Rb: Cellcykelkontroll
  • APC: Wnt-signalering
  • BRCA1/2: DNA-reparation

Lynch syndrom - Hereditär kolorektal cancer

Eriks familj har Lynch syndrom, en autosomalt dominant störning orsakad av mutationer i DNA-mismatch repair (MMR) gener.

🧬 MMR-gener i Lynch syndrom

Gener och frekvens:
  • MLH1: 40% av fallen
  • MSH2: 40% av fallen
  • MSH6: 10% av fallen
  • PMS2: 5% av fallen
  • EPCAM: 5% (epigenetisk)
Cancerrisk:
  • Kolorektal: 80% livstidsrisk
  • Endometrium: 60% (kvinnor)
  • Ovarial: 12%
  • Magsäck: 13%
  • Urinvägar: 8%

📊 Mikrosatellitinstabilitet (MSI)

MMR-defekter leder till ackumulering av mutationer i repetitiva DNA-sekvenser (mikrosatelliter).

MSI-high tumörer karakteriseras av:
  • Hypermutation (1000x normal mutationsfrekvens)
  • Frameshift-mutationer i kodande mikrosatelliter
  • Neoantigenbildning → immunogenicitet
  • Bättre prognos än MSS-tumörer
  • Respons på immunterapi (PD-1/PD-L1-hämmare)

Flerstegskarcinogenes - Vogelstein-modellen

Kolorektal cancer utvecklas genom sekventiell ackumulering av mutationer över 10-15 år.

1
Normal epitel

Frisk kolonmukosa

2
Tidig adenom

APC-mutation (5q21)

Wnt-aktivering

3
Intermediär adenom

KRAS-mutation (12p12)

Proliferation ökar

4
Sen adenom

SMAD4/DCC-förlust (18q21)

TGF-β resistens

5
Karcinom

p53-mutation (17p13)

Genomisk instabilitet

💊 Riktad cancerterapi

Moderna behandlingsstrategier

Förståelse för cellcykeln och cancergenetik har lett till utveckling av riktade terapier mot specifika molekylära mål.

🎯 CDK4/6-hämmare

Läkemedel:
  • Palbociclib (Ibrance)
  • Ribociclib (Kisqali)
  • Abemaciclib (Verzenios)
Verkningsmekanism:
  • Blockerar G1/S-övergång
  • Förhindrar Rb-fosforylering
  • Inducerar cellcykelarrest
  • Särskilt effektivt i HR+ bröstcancer

🛡️ Immunterapi för MSI-high tumörer

Checkpoint-hämmare:
  • Pembrolizumab (Keytruda)
  • Nivolumab (Opdivo)
  • Ipilimumab (Yervoy)
Varför MSI-high svarar:
  • Hög mutationsbörda
  • Många neoantigener
  • T-cellsinfiltration
  • 70% objektiv respons

🧬 Syntetisk letalitet - PARP-hämmare

Utnyttjar cancercellers beroende av alternativa DNA-reparationsvägar.

Koncept:

BRCA-muterade celler saknar homolog rekombination → PARP-hämning leder till celldöd

Godkända PARP-hämmare:
  • Olaparib - Äggstocks- och bröstcancer
  • Rucaparib - Äggstockscancer
  • Niraparib - Äggstockscancer
  • Talazoparib - BRCA+ bröstcancer

Eriks behandling

📋 Behandlingsplan

  1. Kirurgi: Sigmoidektomi med lymfkörtelutrymning
  2. Adjuvant kemoterapi: FOLFOX (5-FU + Oxaliplatin)
  3. Immunterapi: Pembrolizumab (pga MSI-high)
  4. Övervakning: Koloskopi var 1-2 år (Lynch syndrom)
  5. Genetisk vägledning: Familjemedlemmar erbjuds testning

📊 Prognos

MSI-high status ger paradoxalt nog bättre prognos trots högre mutationsbörda:

  • 5-årsöverlevnad: 85% (vs 65% för MSS)
  • Lägre metastasrisk
  • Utmärkt respons på immunterapi
  • Kräver livslång övervakning pga Lynch syndrom

📝 Sammanfattning

🔄 Cellcykeln

  • G1 → S → G2 → M faser
  • Checkpoints säkerställer kvalitet
  • Cyklin-CDK driver progression
  • CKI:er bromsar vid behov

🧬 Cancergenetik

  • Onkogener = gaspedal
  • Tumörsuppressorer = broms
  • Flerstegsprocess över år
  • Genetisk instabilitet accelererar

💊 Behandling

  • CDK4/6-hämmare stoppar G1/S
  • Immunterapi för MSI-high
  • PARP-hämmare vid BRCA-mutation
  • Personlig medicin baserat på genetik

🏥 Kliniska pärlor

Lynch syndrom-screening: Alla kolorektala cancrar <70 år ska testas för MSI/MMR-status
Amsterdam II-kriterier: 3-2-1 regel - 3 släktingar, 2 generationer, 1 före 50 år
MSI-high fördelar: Bättre prognos + immunterapi-respons kompenserar för högre mutationsfrekvens
CDK4/6-hämmare: Kombineras alltid med hormonterapi i ER+ bröstcancer